Avaliação imuno-histoquímica de células de Langerhans e densidade microvascular em ameloblastomas / Immunohistochemistry assessment of Langerhans cells and microvessel density in ameloblastomas

Este estudo objetivou avaliar e correlacionar a microdensidade vascular (MDV) e a quantidade de células de Langerhans (CLs) presentes em ameloblastoma (AB). Vinte e cinco lesões em blocos parafinados de AB foram analisados através de técnica imuno-histoquímica onde foram empregados dois marcadores, anti-CD1a e anti-CD207, para quantificar as células de Langerhans, e o CD34 para avaliar a MDV. A imunomarcação para o CD1a, CD207 e CD34 foi observada em 88% dos casos analisados, mostrando uma significativa associação estatística (p = 0.001, FisherÆs test). Não foi observada correlação estatística entre MDV e CLs, nem relação entre as imunomarcações com os tipos unicístico e sólido. No entanto, a imunomarcação pelo CD1a e CD207 teve uma correlação estatisticamente significante (p valor = 0,001, teste de Spearmann). As CLs e a MDV parecem influenciar na imunopatogênese do ameloblastoma, apesar de não ter sido encontrada correlação estatisticamente significante entre esses dois achados, mas possivelmente por essas células dendríticas produzirem citocinas inflamatórias indutoras de destruição óssea e mitose celular.

The aim of this study was to assess and correlate microvessel density (MVD) and the quantity of Langerhans cells (LC) present in ameloblastomas (AB). Twenty-five paraffin-embedded blocks of AB lesions were analyzed using the immunohistochemical technique in which anti-CD1a and anti-CD207 markers were used to quantify the Langerhans cells and the CD34 marker to assess MVD. In 88% of the analyzed cases immunostaining was observed for CD1a, CD207, and CD34, with statistically significant association (p = 0.001, FisherÆs test). No statistical correlation was observed between MVD and LCs nor between immunostainings with solid and unicyst ameloblastoma. However, statistically significant correlation (p value = 0,001, Spearman test) was observed between CD1a and CD207 immunostaining. The LCs and MVD seemed to influence immunopathogenesis of ameloblastoma, although no statistically significant correlation was observed between these two findings, probably because these dendritic cells produce inflammatory cytokines that induce bone destruction and cell mitosis.

Immunolocalization of FGF-2 and VEGF in rat periodontal ligament during experimental tooth movement

OBJECTIVE: This article aimed at identifying the expression of fibroblast growth factor-2 (FGF-2) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the tension and pressure areas of rat periodontal ligament, in different periods of experimental orthodontic tooth movement. METHODS: An orthodontic force of 0.5 N was applied to the upper right first molar of 18 male Wistar rats for periods of 3 (group I), 7 (group II) and 14 days (group III). The counter-side first molar was used as a control. The animals were euthanized at the aforementioned time periods, and their maxillary bone was removed and fixed. After demineralization, the specimens were histologically processed and embedded in paraffin. FGF-2 and VEGF expressions were studied through immunohistochemistry and morphological analysis. RESULTS: The experimental side showed a higher expression of both FGF-2 and VEGF in all groups, when compared with the control side (P < 0.05). Statistically significant differences were also found between the tension and pressure areas in the experimental side. CONCLUSION: Both FGF-2 and VEGF are expressed in rat periodontal tissue. Additionally, these growth factors are upregulated when orthodontic forces are applied, thereby suggesting that they play an important role in changes that occur in periodontal tissue during orthodontic movement. .

OBJETIVO: o objetivo desse estudo foi identificar a expressão do fator de crescimento de fibroblastos 2 (FGF-2) e do fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) nos lados de tensão e pressão do ligamento periodontal de ratos, durante movimento ortodôntico experimental, em diferentes períodos de tempo. MÉTODOS: uma força ortodôntica de 0,5N foi aplicada no primeiro molar superior direito de 18 ratos Wistar machos, por períodos de 3 (grupo I), 7 (grupo II) e 14 dias (grupo III). O primeiro molar do lado oposto foi utilizado como controle. Os animais foram sacrificados nos períodos de tempo mencionados, sendo a arcada superior removida e fixada. Após a desmineralização, os espécimes foram processados histologicamente e embebidos em parafina. A expressão do FGF-2 e do VEGF foram estudadas por meio de análise imuno-histoquímica. RESULTADOS: o ligamento periodontal dos dentes submetidos à movimentação ortodôntica mostraram maior expressão tanto de FGF-2 quanto de VEGF, em todos os grupos experimentais, quando comparados com os dentes do lado controle (p < 0,05). Diferenças estatisticamente significativas entre os lados de tensão e pressão também foram encontradas nos dentes submetidos à movimentação ortodôntica. CONCLUSÕES: tanto o FGF-2 quanto o VEGF são expressos no tecido periodontal de ratos, e esses fatores de crescimento são aumentados quando forças ortodônticas são aplicadas, sugerindo que esses desempenham um papel importante na reorganização do periodonto durante o movimento ortodôntico. .

Immunohistochemistry assessment of Langerhans cells and microvascular density in oral squamous cell carcinomas / Avaliação imuno-histoquímica de células de Langerhans e densidade microvascular em carcinoma oral de células escamosas

The aim of this study was to assess and correlate microvascular density (MVD) and the quantity of Langerhans cells (LC) present in oral squamous cell carcinoma (OSCC), well as the correlation between this microvascular density and number of Langerhans cells (LCs) with the intensity of the infiltrate, the histologic grading and staging, according to the TNM system. Twenty-three paraffin-embedded blocks of SCC lesions were analyzed using the immunohistochemical technique in which the two anti-CD1a and anti-CD207 markers were used to quantify the Langerhans cells and the CD34 marker to assess MVD. Immunostaining for CD1a, CD207 and CD34 was observed in 100% of the cases analyzed, showing a statistically significant association (p = 0.0001, Fisher’s test). No statistical correlation between MVD and LC or between immunostainings and histological grading of malignancy were found. However, immunostaining for CD1a and CD207 showed a statistically significant correlation (p value = 0.001, Spearman test) and a positive correlation was found between MVD and lymph node involvement. The LCs and MVD seem to involved in immunopathogenesis of oral carcinoma, although no statistically significant correlation was found between these two findings

O objetivo deste estudo foi avaliar e correlacionar a densidade microvascular (MVD) e a quantidade de células de Langerhans (LC) presente no carcinoma epidermoide de boca (CEB), bem como a correlação entre esta densidade microvascular e número das células de Langerhans (CL), com a intensidade do infiltrado, a classificação histológica e de teste, de acordo com o sistema TNM. Vinte e três blocos de parafina-encaixados de lesães SCC foram analisados utilizando a técnica de imuno-histoquímica em que os dois marcadores anti-CD1a e anti-CD207 foram usados para quantificar as células de Langerhans e o marcador CD34 para avaliar MVD. A imunocoloração para CD1a, CD207 e CD34 foi observada em 100% dos casos analisados, demonstrando uma associação estatisticamente significativa (p = 0,0001, teste de Fisher). Não houve correlação estatística entre MVD e LC ou entre imunomarcações e gradação histológica de malignidade foram encontrados. No entanto, a imunocoloração para CD1a e CD207 mostraram uma correlação estatisticamente significativa (p = 0,001, teste de Spearman) e foi encontrada uma correlação positiva entre MVD e comprometimento de linfonodos. O LCs e MVD parecem envolvidos em imunopatogênese de carcinoma oral, embora não foi encontrada correlação estatisticamente significativa entre estes dois resultados.

Stem cells and their niches: importance in tissue engineering applied to dentistry / Células-tronco e seus nichos: importância na engenharia de tecidos aplicada à odontologia

Niches are special microenvironments in tissue where stem cells are located. At these sites, which are a compound of stromal cells, extracellular matrix and soluble factors, complex molecular interactions that maintain the essential properties of stem cells occur, such as self-renewal and differentiation into multiple lineages, according to the organism?s needs. Some adult stem cell niches have already been described, but the majority of them remain unclear, including the dental pulp stem cell niches. Dental pulp stem cells have been isolated from deciduous and permanent teeth and have the potential to self-renew and differentiate. However, little is known about the exact anatomic location of these cells, and the relationship between stem cells and surrounding cells in dental pulp. Understanding how stem cells behave in the niche is extremely important in order to extract these cells from their natural habitat, expand them in vitro and transplant the stem cells back to the patient, to repair and/or regenerate tissues and organs, with no risks to the individual?s integrity. Likewise, the knowledge of stem cell biology is crucial to the development of stem cell therapies, based on tissue engineering applied to dentistry, seeking the regeneration of dental tissues damaged or lost by caries, trauma or genetic diseases.

Os nichos são microambientes especiais nos tecidos onde células-tronco de várias origens estão localizadas. Nestes sítios específicos, formados por vários tipos de células, matriz extracelular e fatores solúveis, complexas interações moleculares ocorrem para que a célulatroncomantenha sua capacidade de autorrenovação e permaneça no seu estado indiferenciado ou se especialize em determinada linhagemcelular, atendendo desta maneira as necessidades do organismo. Alguns nichos de células-tronco adultas já foram descritos, embora a maioriapermaneça desconhecida, como o das células-tronco pulpares. As células-tronco pulpares, já foram isoladas tanto de dentes decíduos comode permanentes e apresentam as características essenciais de uma célula-tronco, como capacidade de autorrenovação e multi-diferenciação.Apesar disso, pouco se sabe a respeito da localização anatômica destas células na polpa, assim como as possíveis interações funcionais entreas células-tronco pulpares e as células do estroma circundante. O entendimento de como as células-tronco interagem com o microambienteonde estão inseridas é essencial para que se possa extrair as mesmas do seu habitat natural, cultivá-las in vitro e aplicá-las em diferentessítios para que promovam o reparo e/ou regeneração de tecidos e órgãos, sem que isso represente um risco à integridade do organismo. Da mesma forma, o conhecimento de como estas células se comportam e respondem ao meio é fundamental para o desenvolvimento de terapias baseadas na utilização de células-tronco, que através da engenharia de tecidos aplicada à odontologia, visa à reestruturação de tecidos dentários danificados e/ou perdidos por cárie, trauma ou distúrbios genéticos.

Immunological characteristics of mesenchymal stem cells

Although bone marrow is the main source, mesenchymal stem cells have already been isolated from various other tissues, such as the liver, pancreas, adipose tissue, peripheral blood and dental pulp. These plastic adherent cells are morphologically similar to fibroblasts and have a high proliferative potential. This special group of cells possesses two essential characteristics: self-renewal and differentiation, with appropriate stimuli, into various cell types. Mesenchymal stem cells are considered immunologically privileged, since they do not express costimulatory molecules, required for complete T cell activation, on their surface. Several studies have shown that these cells exert an immunosuppressive effect on cells from both innate and acquired immunity systems. Mesenchymal stem cells can regulate the immune response in vitro by inhibiting the maturation of dendritic cells, as well as by suppressing the proliferation and function of T and B lymphocytes and natural killer cells. These special properties of mesenchymal stem cells make them a promising strategy in the treatment of immune mediated disorders, such as graft-versus-host disease and autoimmune diseases, as well as in regenerative medicine. The understanding of immune regulation mechanisms of mesenchymal stem cells, and also those involved in the differentiation of these cells in various lineages is primordial for their successful and safe application in different areas of medicine.